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    聚合物反相色谱填料

    聚合物反相色谱填料

    强耀生物采用微球合成技术可规?;票妇郾揭蚁?二乙烯基苯和聚甲基丙烯酸酯为基质的两种性能互补的高性能聚合物反相色谱填料,这些填料具有刚性强、粒径均一、低反压、耐酸碱等特点。强耀生物聚合物反相色谱填料具有不同的粒径规格(3μm、5μm、10μm、15μm、20μm、25μm、30μm、40μm和50μm)和优化的孔径结构(100?、300?、500?和800?四种孔径)以及无孔结构,可以满足从实验室分析到大规模工业分离的各种需求,如天然产物、抗生素、有机化合物、多肽、蛋白质和寡核苷酸等药物分子的高效分离。

    聚合物反相色谱填料的特点::

    1. 球形,粒径高度均一
    2. 化学稳定性高和宽pH值范围(pH=1-14)
    3. 优化的孔径结构
    4. 高比表面积和高载量
    5. 机械强度高
    6. 低反压、柱效高
    7. 不同极性基质的选择

    粒径高度均一

    控制微球的粒径和均一性对色谱应用至关重要,因为微球的粒径和粒径分布通??梢跃龆ㄖ?。在色谱分离中,溶质的纵向扩散是色谱带和色谱峰拓宽的主要原因。对于特定大小的微球,采用均一微球装填的色谱柱可以有效地缩窄色谱带和色谱峰,还可以获得最低的反压,从而使这些色谱柱呈高柱效和高分辩率。

    强耀生物可以提供从3μm到50μm范围内任意大小、粒径均一的聚合物反相色谱填料,客户可以任意选择,强耀生物能够根据客户的需求定制。图1显示了 QY-系列聚合物反相色谱填料不同粒径大小的扫描电镜图。

    采用Beckman Coulter Counter测量强耀生物聚合物色谱填料的粒径分布图,如图2所示,填料的变异系数即CV<3%。结果表明强耀生物的聚合物色谱填料具有高度的均一性。

    强耀生物
    图1. 聚合物反相色谱填料不同粒径大小的扫描电镜图 强耀生物
    图2. 聚合物反相色谱填料的粒径分布图

    优化的孔结构

    微球的孔径大小与色谱填料的比表面积有很大的关系,孔径越小则比表面积越大。目标分离物质为小分子,通常选择孔径小的色谱填料;目标分离物质为生物大分子,则选择孔径较大的色谱填料。对于特定的目标分离物质,选择优化的孔径结构色谱填料不仅可以增加上样量,而且还可以提高分离纯度。

    强耀生物可以提供不同孔径大小的色谱填料,包括100?、300?、500?和800?四种孔径。图3为强耀生物的四种不同孔径大小的均一聚合物反相色谱填料的扫描电镜图。

    强耀生物
    图3. 四种不同孔径大小的均一聚合物反相色谱填料的扫描电镜图

    批次间的稳定性

    强耀生物采用成熟的聚合物微球规?;际?,能确保色谱填料的批次稳定性。我们对每批次产品的性能(如粒径大小和粒径分布等)都进行质量评价。图4显示了不同批次的填料产品性能,说明了我们规?;奶盍暇哂辛己玫奈榷ㄐ?。图5显示了18批次的填料应用于蛋白的分离纯化,色谱图进一步说明了我们的色谱填料批次间的稳定性。

    强耀生物
    图4:不同批次的填料产品的粒径大小和粒径分布的稳定性
    强耀生物
    强耀生物
    图5. 色谱填料分离蛋白18批次的重现性

    化学稳定性高

    强耀生物的QY-系列聚合物反相色谱填料是由高交联的聚苯乙烯/二乙烯基苯或者是高交联的聚甲基丙烯酸酯组成,其在全pH值范围(pH 1-14)内具有良好的稳定性。在极端的酸性溶液(如1M HCl)或极端的碱性溶液(如1M NaOH)和有机溶剂(包括乙醇、甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、DMSO、四氢呋喃等)中都可以保持微球的结构稳定和性能的稳定性。

    不同极性色谱填料的选择

    强耀生物的QY-系列聚合物反相色谱填料是由高交联的聚苯乙烯/二乙烯基苯或者是高交联的聚甲基丙烯酸酯组成。通过调节不同基质的比例,强耀生物可以提供不同极性的聚合物反相色谱填料,包括QY-PS,QY-PSM和QY-PMM三种不同极性的填料,填料的极性逐步增强。

    强耀生物

    反压低、高柱效

    强耀生物的QY-系列聚合物反相色谱填料的粒径高度均一、刚性强,因此,填装后的色谱柱的柱床稳定,反压低。QY-10PS-300色谱填料的塔板数可以达到50000 N/m。

    色谱填料的多种选择

    纯化工艺基本分为粗提、中间纯化和精细纯化等三个分离步骤。强耀生物的QY-系列聚合物反相色谱填料可以提供从样品的粗提、中间纯化和精细纯化整个分离过程的选择。

    粗提:是指从样品中捕获目标成分,初步分离目标物,属于低分辨率的分离纯化,纯度一般能达到70~90%??裳≡?00微米的QY-系列色谱填料。

    中间纯化:是指从捕获到的目标物中除去大部分杂质,属于中高等分辨率的分离纯化,纯度能达到90~98%??裳≡?0微米或40微米的QY-系列色谱填料。

    精细纯化:是指目标物达到预期的纯度,除去与目标物结构类似的物质,属于高分辨率的分离纯化,纯度能达到98~99%以上??裳≡?0微米的QY-系列色谱填料。

    强耀生物聚合物反相填料分离纯化案例

    胰岛素的分离纯化
    强耀生物开发了一整套完整的胰岛素分离纯化工艺,成功的将胰岛素粗品从45%一步纯化到99%

    强耀生物强耀生物


    制备条件:
    仪器:高压设备
    上样量:100mg/ml
    检测:214nm

    万古霉素的分离纯化:

    强耀生物

    强耀生物对万古霉素的分离纯化建立了一套完整的纯化工艺,成功的将万古霉素粗品从85%一步纯化到98%以上,收率达到70%以上。

    制备条件: 仪器:中压设备
    上样量:100mg/ml
    检测:280nm
    QY-PS40-300填料技术参数
    检测项目 技术指标
    填料基质 PS/DVB微球
    微球粒径 (μm) 40 ± 2
    CV值 < 3%
    交联度 80%
    孔径 (?) 300
    pH值范围 1-14
    外观、色泽 球形,白色或淡黄色
    干粉堆积密度(g/ml) 0.25-0.30
    比表面积(m2/g) 800
    孔容(ml/g) 1.5
    胰岛素动态载量(mg/ml) 50
    金属离子含量 <10 ppm
    最大压力 100 bar
    化学稳定性 几乎适用于所有溶剂(包括:纯水、异丙醇、乙醇、乙腈、1M HCl、1M NaOH;甲醇等。
    填料的清洗和再生 聚合物反相填料可以在线清洗或转移到容器中处理??捎梅羌灾鸾ピ銮康娜芗燎逑瓷滋盍?,也可以采用碱洗。建议0.1-0.5M NaOH 60%甲醇溶液冲洗,再用0.1-0.5M HCl 60%甲醇溶液冲洗,然后用流动相平衡。
    储存 20%乙醇
    保存条件 室温
    表1: 聚合物反相色谱填料产品
    产品名称 粒径(μm) 孔径(?) 介质组成
    QY-3PS 3 无孔, 100, 300, 500, 800PS/DVB
    QY-5PS 5 无孔, 100, 300, 500, 800 PS/DVB
    QY-10PS 10 无孔, 100, 300, 500, 800 PS/DVB
    QY-15PS 15无孔, 100, 300, 500, 800 PS/DVB
    QY-20PS 20 无孔, 100, 300, 500, 800 PS/DVB
    QY-25PS 25 无孔, 100, 300, 500, 800 PS/DVB
    QY-30PS 30 无孔, 100, 300, 500, 800 PS/DVB
    QY-40PS 40 无孔, 100, 300, 500, 800 PS/DVB
    QY-50PS 50 无孔, 100, 300, 500, 800 PS/DVB
    QY-60PS 60 无孔, 100, 300, 500, 800 PS/DVB
    QY-100PS 100 无孔, 100, 300, 500, 800 PS/DVB
    QY-200PS 200无孔, 100, 300, 500, 800PS/DVB
    QY-10PSM 10 无孔, 100, 300, 500, 800Poly DVB/acrylate
    QY-15PSM 15 无孔, 100, 300, 500, 800 Poly DVB/acrylate
    QY-20PSM 20 无孔, 100, 300, 500, 800 Poly DVB/acrylate
    QY-30PSM 30 无孔, 100, 300, 500, 800 Poly DVB/acrylate
    QY-40PSM 40 无孔, 100, 300, 500, 800 Poly DVB/acrylate
    QY-50PSM 50 无孔, 100, 300, 500, 800 Poly DVB/acrylate
    QY-60PSM 60 无孔, 100, 300, 500, 800 Poly DVB/acrylate
    QY-100PSM 100 无孔, 100, 300, 500, 800 Poly DVB/acrylate
    QY-200PSM 200 无孔, 100, 300, 500, 800 Poly DVB/acrylate
    QY-10PMM 10 无孔, 100, 300, 500, 800 Polyacrylate
    QY-15PMM 15 无孔, 100, 300, 500, 800 Polyacrylate
    QY-20PMM 20 无孔, 100, 300, 500, 800 Polyacrylate
    QY-30PMM 30 无孔, 100, 300, 500, 800 Polyacrylate
    QY-40PMM 40 无孔, 100, 300, 500, 800 Polyacrylate
    QY-50PMM 50 无孔, 100, 300, 500, 800 Polyacrylate
    QY-60PMM 60 无孔, 100, 300, 500, 800 Polyacrylate
    QY-100PMM 100 无孔, 100, 300, 500, 800 Polyacrylate
    QY-200PMM 200 无孔, 100, 300, 500, 800Polyacrylate
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